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实验性大鼠脑出血急性期血浆和脑组织中胰岛素样生长因子-1的含量

时间:2017-10-20 11:00:07 来源: 代写硕士论文

                  作者:吕云利 付学锋 路奎 廖军 徐文武 


【关键词】  大鼠
  关键词: 大鼠;脑出血;胰岛素生长因子-1;脑组织;血浆 
  摘 要:目的  探讨胰岛素生长因子-1(IGF-1)在实验性脑出血大鼠急性期血浆和脑组织中的含量变化,阐明在脑出血过程的作用. 方法  SD大鼠80只,随机分为对照组、小量脑出血组、中量脑出血组和大量脑出血组,每组20只,每组按出血后1,8,24,48和72h再分成5小组,每小组4只.采用Nath法建立大鼠脑出血模型,用放射免疫法测定血浆和脑组织中IGF-1的含量. 结果  与对照组相比,大,中,小量脑出血组在脑出血后1h血浆中的IGF-1量开始减少,但无显著差异,8,24和48h下降明显(P<0.01),以8h下降最明显,72h已恢复至1h水平,与对照组相比,脑出血后1,8,24和48h血肿周围脑组织中IGF-1的含量明显增高(P<0.01),8h为峰值,以后逐渐下降,72h接近对照组.大,中,小量脑出血组在8,24和48h时象相比有非常明显差异(P<0.01). 结论  IGF-1可能参与了脑出血的病理生理过程,是一个新的相关因素.
      
  Keywords:rat;cerebral hemorrhage;insulin-like growth factor-1;perihemotoma;plasma
     
  Abstract:AIM To observe insulin-like growth factor-1(IGF-1)concentration change in plasma perihemotoma of rats with acute cerebral hemorrhage in order to explore the effect of IGF-1on acute cerebral hemorrhage.METHODS Eighty SD rats weighted250~300g were randomly assigned to four groups:control group,and little,medium,large quantity hemorrhage groups with each group divided into1,8,24,48and72h post hemorrhage subgroups.The model of cerebral hemorrhage was copied according to Nath’s and IGF-1contents in rat plasma and perihemotoma were mea-sured with radioimmunoassay.RESULTS Compared to con-trol group,plasma IGF-1content began to decrease after a-cute cerebral hemorrhage,with no significant difference at1and72h,significant difference(P<0.01)at8,24and48h post cerebral hemorrhage,especially at8h;and with no sig-nificant difference at the same time-points during three exper-iment groups.Compared to control group,IGF-1contents in perihemotoma appeared statistically significantly higher dur-ing48h post acute hemorrhage(P<0.01),at the peak at8h,but72h post hemorrhage not significantly higher.Among three experiment groups,IGF-1contents in large quantity hemorrhage group appeared significantly higher than that in little and medium hemorrhage ones from8to48h post hem-orrhage(P<0.01).CONCLUSION IGF-1might be in-volved in the pathogenesis of acute cerebral hemorrhage.
     
  0 引言
     
  胰岛素生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)具有促进生长发育,促进物质代谢,降低血糖,促进细胞分裂增殖作用.由于它能介导生长激素的作用,也曾被称为生长介素.它对细胞的生物效应是通过其受体来实现的.随着分子生物学的发展,其在神经系统的作用,已广泛受到重视.1997年,Schwabs等[1] 首次报告了20多例急性缺血性脑卒中患者血浆IGF-1水平明显低于对照组,并认为它在急性缺血性脑损害的病理生理过程及治疗中可能有重要的作用,但IGF-1在急性脑出血血浆和血肿周围脑组织中的含量变化国内外尚未见报道.我们采用大鼠脑出血模型,动态观察急性脑出血脑组织中IGF-1的含量,并探讨IGF-1在脑出血的病理生理过程中的意义.
     
  1 材料和方法
     
  1.1 材料  健康雄性SD大鼠80只(第四军医大学实验动物中心提供),体质量250~300g,随机分为对照组、小量脑出血组、中量脑出血组及大量脑出血组,每组20只,每组又分为出血后,1,8,24,48和72h,5小组,每小组4只.
     
  1.2 方法  采用Nath等[2] 方法将大鼠用戊巴比妥钠ip麻醉(30mg・kg-1 ),俯卧位固定于立体定位仪上,找到前囟后0.2mm,中线右侧旁开3mm处,用钻头钻一直径为1.5mm圆孔,深度达硬脑膜表面,微量注射器沿孔进针约6mm;将未肝素化的大鼠自体动脉血(尾动脉)以20μL・min-1 ,速度推入脑,缓慢出针,小量出血组注射血量为25μL,中量为50μL,大量为100μL,对照组操作过程同上,但不向脑内注射血,注射部位为尾壳核.术后根据Rosen-berg[3] 的评定方法判定大鼠神经损害症状,成功率为100%.而对照组无神经损害体征.按规定时间(1,8,24,48和72h)麻醉动物,开胸心脏刺取血2mL,迅速置入含有100g・L-1 EDTA-Na2 20μL抑肽酶20μL试管混匀,取完血浆后,行主动脉插管,生理盐水250mL快速灌注,立即取出脑组织入100℃生理盐水中煮5min,分离出血肿及周围脑组织称重,置匀浆器(0.1mol HCl的匀浆液)匀浆,对照组的取材与出血部位相同(即尾壳核周围).上述匀血浆和匀浆液在4℃3000r・min-1 离心10min,取上清液-20℃贮存待测.IGF-1药盒属由美国Diagnostic Systems Laboratories Inc.USA提供.测定过程按说明书进行.
    
  统计学处理:结果以x ±s表示,用方差齐性检验SPSS软件处理.
     
  2 结果
     
  2.1 血浆的IGF┐1含量  与对照组相比,大中小出血组血浆中IGF-1含量在脑出血后1h即有下降趋势,但无差异性,8,24和48h下降呈显著差异(P<0.01),以8h下降最明显;72h仍有下降,已恢复到1h水平(P>0.05).3个实验组在同一时点相比及对照组各时点相比均无显著差异(P>0.05,Tab1). 
  2.2 脑组织中的IGF┐1含量  与对照组相比,大,中,小出血组血肿周围脑组织中IGF-1含量在脑出血后1,8,24和48h明显升高(P<0.01),8h为峰值,以后逐渐下降,72h接近对照.大量出血组与中,小量出血组在8,24和48h时象有明显性差异(P<0.01),对照组呈逐渐升高趋势(Tab2).

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